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分光光度计的结构原理

无论光度计,色度计或分光光度计,基本结构原理都是类似的。它们由光源,单色器,狭缝,吸收杯和检测器系统组成。

、光源

良好的光源需要高发光强度,明亮稳定,光谱范围宽,使用寿命长等优点。几乎所有的光度计都使用调节钨丝灯(钨灯)。 它适合在340-900nm光源范围内使用。更先进的可见分光光度计加上稳压氢灯(氢灯)。 适用于对光源进行200-360nm紫外光谱分析。

二、单色光器

分光光度法测定物质的吸光度需要在特定波长下进行。单色器的效果是根据需要选择特定波长范围的单色光。在实际工作中难以选择单波长的光。所谓的单色光是指在该波长下以及在发射方面较少能量的相邻长和较短波长范围内的大发射。单色光的波长范围越窄,仪器的灵敏度越高,测量结果就越可靠。

简单的单色光是在光电比色计上使用的滤光器(玻璃的某种颜色)。由于光谱范围较宽,因此光电色度计的分辨率较差,但对比度颜色分析仍可以得到更令人满意的结果。棱镜衍射光栅是种好的单色仪。它们可以在宽光谱范围内分离相对单的波长。

三、狭缝

通过单色仪发射的光的强度可能太强或太弱以促进进步的检测。狭缝是由光路上的对挡板形成的狭缝。通过调节狭缝的大小来调节入射单色光强度和入射光以形成平行光以满足检测器的需要。光电比色计的狭缝是固定的,上海精科光度计和上海精科可见分光光度计的狭缝尺寸是可调的。

四、吸收杯

吸光杯也称为样品杯,光度测量系统是重要的部分之。在可见光范围内测量使用光学玻璃吸收杯,在紫外范围内测量使用石英吸收杯。注意保护吸收杯的质量是获得良好分析结果的重要条件之。要使用粗糙的硬质材料接触吸杯,不能用手指抓住杯子的光学表面的吸收; 用后用水冲洗,不要离开测定液体,特别是蛋白质和核酸溶液。

五、检测器系统

诸如硒光伏电池,光电管或光电倍增管的光伏元件通常用作光接收器,以将通过吸收杯的光的能量转换为电能。 然后进步使用适当的方法来测量产生的电流。 带有硒光伏电池的光电比色计用于接收器。 硒光伏电池具有低的光灵敏度。 它不能检测非常弱的光的强度。 并且对波长为270nm以下和700nm以上的光波不敏感。

更复杂的分光光度计是真空光电管或光电倍增管作为接收器,并使用放大器件来提高灵敏度。尽管窄单色光能量的光谱比宽范围弱得多,但是具有灵敏检测系统的该放大电路仍然可以被精确地检测。

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