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如何选择荧光分光光度计的滤光片?

如何选择荧光分光光度计的滤光片?


    荧光分光光度计在使用时,需要注意开机次序,以保护设备之间不受影响。荧光光谱仪开机顺序一般为先开氙灯,然后开仪器主机,后开跟仪器连接的计算机。如此操作的原因在于稳态氙灯是高压点亮,为了避免瞬问脉冲电流对周围设备造成影响,需要先开氙灯,等电流稳定后再打开周边的电脑等设备。关机顺序则相反。荧光定量分析多采用工作曲线法,即以已知量的标准物质,按试样相同方法处理后,配成一系列标准溶液,测定其相对荧光强度和空白溶液的相对荧光强度;扣除空白值后,以荧光强度为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,绘制工作曲线;然后将处理后的试样配成一定浓度的溶液,在同一条件下测定其相对荧光强度,扣除空白值后,从工作曲线上求出荧光物质的含量。

     在进行发射图谱扫描分析时,根据斯托克斯定律,设置的激发波长要比发射波长短,例如,激发波长λex=260nm,则发射起始波长应该从大于260nm的波长开始,比如270nm,发射结束波长为870nm。这样一来,在激发光的2倍波长(520nm)、3倍波长(780nm)处都会出现激发波长的尖锐的倍频峰,若与荧光光谱峰重叠,将会对测试产生干扰,需选用合适的滤光片将其滤掉。




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