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设置荧光分光光度计的狭缝要注意哪些事项

设置荧光分光光度计的狭缝要注意哪些事项


荧光分光光度计是用来扫描液相荧光标记物荧光光谱的仪器。它可以提供激发光谱、发射光谱、荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振度等物理参数。通过这些参数的确定,不仅可以进行般的定量分析,而且可以推断分子在各种环境中的构象变化,从而阐明分子结构与功能的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围般为190~650nm,发射波长扫描范围为200~800nm。它可用于液体和固体样品的光谱扫描,如凝胶条。

许多因素,如溶液的厚度、荧光强度等,都与溶液的厚度、荧光强度等因素有关。然而,荧光强度的峰值位置很容易确定,可以用来确定什么样的物质。荧光定量分析必须确定些条件。

狭缝的大小对荧光强度非常重要。狭缝的大小可以根据你测量的物质的荧光强度来调整。在相同浓度下,如果荧光强度过高,超过仪器的量程,可以减小狭缝。然而,需要指出的是,荧光强度不仅受狭缝尺寸的影响,还受分辨率的影响。对于荧光扫描,增加狭缝可以提高荧光强度和重现性,但分辨率会降低。分辨率由狭缝决定,当仪器其他结构固定时,分辨率由狭缝尺寸决定(光栅线数、焦距和综合线性色散系数)。在实际应用中,狭缝尺寸应与测量峰的半峰宽相匹配。如果太大,峰会变形。它也决定了狭缝的大小。根据经验值,如果狭缝扩大倍,光通量将增加4倍。



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